Влияние условий культуры на рост Escherichia Coli

Использование E. coli для производства лекарств является биологическим методом. То есть, использование биоинженерных технологий для переноса чужеродных генов в E. coli, ферментация и культивирование для экспрессии, центрифугирование для сбора бактерий, а затем использование специфического раствора для разрушения бактерий и их сбора. Целевой белок превращается в лекарство после некоторой последующей обработки.

1. Температура культуры

Эксперименты показывают, что оптимальная температура культуры находится в диапазоне 35 ~ 40 ℃, а плотность клеток увеличивается с увеличением температуры, что согласуется с общими характеристиками роста E. coli. Тем не менее, темпы роста выше при 37 ℃ ~ 38 ℃, и последующий рост относительно ровный. Сочетая общие характеристики культуры E. coli и перекрестное влияние температуры и других влияющих факторов, температура культуры была установлена на уровне 37,5 ° C в эксперименте.

2. значение pH

После культивирования E. coli в течение 18 часов с различными значениями pH результаты испытаний показывают, что значение pH 8,0 не оказывает существенного влияния на плотность клеток, а значение pH слишком низкое или слишком высокое для достижения хороших результатов. Когда значение пэ-аш 7,5, плотность клетки относительно самая высокая, и свое ОД600нм достигает 3,25.

3. Влияние растворенного кислорода на рост бактерий

Согласно различному индексу растворенного кислорода в ферментате, была получена плотность клеток системы ферментации при культивировании в течение 18 часов. Экспериментальные результаты показывают, что плотность клеток непрерывно увеличивается с увеличением индекса растворенного кислорода, но плотность клеток медленно увеличивается после 50%.

4. Влияние количества привития

Оптимизация различных количеств инокуляции может оказать большее влияние на рост бактерий. При 3%-4% состояние роста бактерий лучше, чем при слишком низких или высоких количествах инокуляции. Слишком низкое количество привития сделает рост бактерий слишком медленным. Слишком высокое количество инокулята будет потреблять большое количество питательных веществ на ранней стадии и вызывать отходы семенных штаммов, поэтому в эксперименте было использовано 4% инокулята.

5. Определение времени культуры

Экспериментальные результаты разных времен инкубации показали, что бактерии увеличивались кратно от 12 до 18 часов, а затем росли медленно. Это показывает, что на более поздней стадии экспоненциального роста энергия бактерий не подходит для массового размножения, но зависит от метаболитов. Поэтому, для того чтобы сократить цикл роста, урожай бактерий должен быть в конце экспоненциального периода роста, то есть, 18h.

6. Определение скорости

Скорость встряхивания инкубатора увеличивается с увеличением растворенного кислорода и соответственно увеличивается плотность клеток. Скорость роста плотности клеток выше при 100 ~ 200 об/мин и относительно медленная при 200 ~ 300 об/мин, что указывает на то, что скорость 200 об/мин уже может способствовать растворению кислорода в воздухе. Принимая во внимание, что увеличение скорости может привести к неблагоприятным последствиям, таким как пена, поэтому лучшая скорость, принятая в испытании, составляет 200 об/мин.

* Выше-академический обмен статьями. Если вам нужна более подробная информация, нажмите на заголовок.